激素與代謝指標是評估機體內分泌功能及代謝狀態的核心生物標志物，其檢測結果的準確性直接影響內分泌疾病（如甲狀腺功能異常、糖尿病）、代謝綜合征（如肥胖、高血脂）等領域的科研結論。目前，科研中常用的檢測技術包括高效液相色譜法（HPLC）、質譜法（MS）及酶聯免疫吸附法（ELISA）：HPLC 與 MS 雖靈敏度高，但設備成本昂貴、操作流程復雜且檢測周期長，難以滿足中小實驗室批量樣本的常規檢測需求；而ELISA因操作簡便、通量高、成本可控等優勢，成為科研中激素與代謝指標檢測的主流技術。
酶標儀作為ELISA的核心配套設備，其光學性能（如波長準確性、吸光度穩定性）與數據處理能力直接決定檢測結果的可靠性。博清生物科技（南京）有限公司作為國內體外診斷設備領域的代表性企業，其研發的酶標儀采用了雙波長檢測技術及自動校正功能，宣稱可滿足科研級檢測需求，但目前關于該設備在激素與代謝指標檢測中的系統性性能驗證研究尚未見報道。
一、材料與方法
（一）實驗儀器
1、主檢測儀器：博清生物酶標儀；
2、對照儀器：品牌酶標儀；
3、輔助設備：高速離心機、恒溫水浴箱、超低溫冰箱。
（二）實驗試劑與樣本
1、ELISA試劑盒：胰島素、皮質醇、T3、T4、TG、FBG；
2、標準品與質控品：均為試劑盒配套產品，高、中、低3個濃度水平；
3、樣本來源：SPF級SD大鼠。大鼠禁食12h后腹腔注射10%水合氯醛（3mL/kg）麻醉，腹主動脈取血，3000r/min 離心15min分離血清，-80℃保存待測，共收集30份樣本。
（三）實驗方法
1、樣本檢測流程
嚴格按照ELISA試劑盒說明書操作，具體步驟如下：
樣本復溶：將冷凍血清樣本置于4℃冰箱解凍，室溫平衡30min后輕輕混勻；
加樣：向96孔板中加入標準品（50μL/孔）、質控品（50μL/孔）、樣本（50μL/孔），空白孔加等量PBS；
孵育與洗板：每孔加酶標二抗（50μL/孔），37℃恒溫水浴箱孵育60min；孵育結束后，用洗滌液洗板5次，每次浸泡30s，拍干殘留液體；
顯色與終止：每孔加底物溶液（100μL/孔），37℃避光孵育15min；加終止液（50μL/孔），輕輕混勻；
2、性能驗證指標與數據分析
精密度：選取高、中、低3個濃度的質控品，每個濃度重復檢測10次（批內），連續檢測5天（批間），計算批內CV（公式：CV=（標準差/均值）×100%）與批間CV，CV<5%為合格；
準確度：采用加標回收實驗，向已知濃度的大鼠血清樣本中加入高、中、低3個濃度的標準品，每個濃度平行檢測3次，計算回收率（公式：回收率=（加標后檢測濃度-加標前檢測濃度）/加標量×100%），回收率85%-115%為合格；
結果一致性：對30份大鼠血清樣本進行平行檢測，以檢測結果為橫坐標，博清生物酶標儀檢測結果為縱坐標，繪制散點圖并進行Pearson相關性分析，R2>0.95為一致性良好；
線性范圍：將各指標標準品按濃度梯度稀釋（0、1/8、1/4、1/2、1、2倍標準品濃度），檢測OD值，以標準品濃度為橫坐標、OD值為縱坐標繪制標準曲線，計算線性相關系數r，r>0.99為線性良好。
所有數據采用SPSS 26.0軟件分析，計量資料以“均值±標準差（x±s）”表示，P<0.05 為差異有統計學意義。
二、結果
（一）博清酶標儀的精密度驗證
博清生物酶標儀檢測6項指標的批內CV為1.23%-3.85%，批間CV為1.89%-4.52%，均低于5%的合格標準，其中胰島素、T3的CV值最低（批內<2%，批間<3%），表明該儀器在激素與代謝指標檢測中具有良好的重復性與穩定性。
（二）博清酶標儀的準確度驗證
6項指標的加標回收率為88.6%-109.2%，均處于85%-115% 的合格范圍內，其中胰島素、T3、T4的回收率更接近100%（92.5%-105.3%），表明博清生物酶標儀檢測結果的準確性良好，可真實反映樣本中指標的實際濃度。
（三）博清酶標儀與參比儀器的結果一致性
檢測30份大鼠血清樣本的結果呈顯著正相關，6項指標的相關系數R2均>0.98（P<0.001），其中胰島素（R2=0.992）、T3（R2=0.991）的一致性最佳，TG（R2=0.983）、FBG（R2=0.985）的一致性略低但仍符合科研要求，表明博清酶標儀的檢測結果與國際主流品牌儀器具有高度一致性，可用于科研數據的橫向對比。
（四）博清酶標儀的線性范圍驗證
各指標標準曲線的線性相關系數r均>0.99，其中胰島素（r=0.998）、T4（r=0.997）的線性關系最穩定，TG（r=0.992）的線性略低但仍滿足ELISA檢測要求，表明博清生物酶標儀在試劑盒規定的濃度范圍內，可準確擬合標準曲線，實現樣本濃度的精準計算。
三、討論
激素與代謝指標的精準檢測是內分泌及代謝科研的基礎，而酶標儀的性能直接決定檢測結果的可靠性。本研究從精密度、準確度、結果一致性及線性范圍4個核心維度，系統驗證了博清生物酶標儀的科研適用性，結果表明該儀器可滿足激素與代謝指標的常規檢測需求，具體優勢如下：
（一）性能穩定，滿足科研級檢測標準
本研究中，博清生物酶標儀的批內CV<4%、批間CV<5%，顯著低于ELISA檢測的行業CV上限（通常為10%），表明其在重復檢測中具有良好的穩定性；加標回收率88.6%-109.2%，符合“85%-115%”的準確度要求，可避免因儀器誤差導致的檢測結果偏離；與國際主流品牌酶標儀的R2>0.98，說明其結果可與現有科研數據兼容，降低了設備更換導致的數據偏差風險。
（二）操作便捷，適配科研批量檢測場景
博清生物酶標儀支持96孔板同時檢測，單批次檢測時間<30min（含OD值讀取與數據計算），且具備自動波長校正及標準曲線擬合功能，可減少人工操作誤差；此外，該儀器與國內主流ELISA試劑盒兼容性良好，無需額外調整檢測參數，降低了科研人員的操作門檻，尤其適合中小實驗室的批量樣本檢測。
（三）成本可控，性價比優勢顯著
相較于國際主流品牌酶標儀成本較高，博清生物酶標儀的采購成本更低，且耗材（如檢測板、洗滌液）可適配國產試劑，進一步降低科研成本。對于經費有限的中小實驗室或需要多臺設備并行檢測的團隊，該儀器可在保證檢測質量的前提下，提升科研資源的利用效率。
（四）研究局限性與未來方向
本研究存在以下局限性：①樣本類型僅為大鼠血清，未涵蓋人血清、血漿或組織勻漿等其他科研常用樣本，未來需進一步驗證儀器在不同樣本類型中的適用性；②檢測指標僅包含6項核心指標，未涉及性激素（如雌激素、睪酮）、 adiponectin等新興代謝標志物，需擴展指標范圍以覆蓋更多科研場景；③未評估儀器在長期使用（如1年以上）后的性能衰減情況，需開展長期穩定性監測。
博清生物科技（南京）有限公司研發的酶標儀在激素與代謝指標檢測中具有良好的精密度、準確度及結果一致性，線性范圍穩定，且操作便捷、成本可控，可作為內分泌及代謝相關科研的常規檢測設備。未來可通過擴展樣本類型、增加檢測指標及長期穩定性驗證，進一步提升該儀器的科研應用場景覆蓋度。
